人視網(wǎng)膜色素上皮細胞【Human Eye: Normal Retinal Pigment Epithelial Cells Derivatives】
  人視網(wǎng)膜色素上皮細胞費用人視網(wǎng)膜色素上皮細胞提取物是從人原代視網(wǎng)膜色素上皮細胞提取的，人原代視網(wǎng)膜色素上皮細胞從正常人視網(wǎng)膜色素上皮組織制備。正常人視網(wǎng)膜組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。        cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA*鏈，以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及0mg總RNA。68℃反應(yīng)0min 后終止RT反應(yīng)。利用x RT Buffer 運輸cDNA， μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。        蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。        潛在的應(yīng)用： <>已知基因的PCR克??；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標(biāo)測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué)；<6>芯片研究與表達圖譜

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注意事項：
. 接收到人視網(wǎng)膜色素上皮細胞費用，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

培養(yǎng)步驟：
人視網(wǎng)膜色素上皮細胞費用對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

CD49C 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 IHC-P    50 µg

Cadherin-2 / CDH2 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

CSFR / MCSF Receptor / CD5 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM    25 Test

CD7 / N-CAML / LCAM 抗體, 兔單抗 ELISA    50 µg

CD32 / FCGR2 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

AGO2 / Argonaute 2 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

CD66 / ALCAM 抗體 (FITC), 鼠單抗 FCM    25 Test

ABHD4B 抗體, 兔單抗 WB   IP    50 µg

FATP4 / SLC27A4 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

Cytoglobin / CYGB 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µg

人視網(wǎng)膜色素上皮細胞費用蓋玻片 8×8mm 00片  盒

Decitabine (5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷) 25mg  支

2-Methoxycinnamic acid 鄰甲氧基肉桂酸 53376  20mg

Dodecyl β-D-maltopyranoside 十二烷基-β-D-麥芽糖苷 250mg  瓶

Euphobiasteroid 千金子甾醇 28649-59-4  20mg

Kanamycin (00mg/ml) 0ml  瓶

Theaflavin 茶黃素 0850  20mg

Thidiazuron 噻苯隆 g  瓶

PMSF　苯甲黃酰氟 g  瓶

Gracillin 纖細 9083-00-2  20mg

40%丙烯酰胺(37.5:) 500ml  瓶