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技術(shù)文章

做到這些可減少Elisa試劑盒故障的發(fā)生!
點(diǎn)擊次數(shù):584 更新時(shí)間:2020-12-27
  ELISA是指以酶作為標(biāo)記物、以抗原和抗體之間免疫結(jié)合反應(yīng)為基礎(chǔ)的固相吸附測(cè)定方法。因此,一個(gè)ELISA測(cè)定試劑,其有機(jī)組成部分包括:包被的抗原或抗體的固相支持物,即聚苯乙烯塑料微孔或試管;酶標(biāo)記的抗體或抗原和酶的反應(yīng)底物等。
 
  抗原或抗體的固相化,并不影響其免疫結(jié)合活性,酶標(biāo)記的抗體或抗原亦是如此,并且標(biāo)記酶的活性不因標(biāo)記過(guò)程而喪失。整個(gè)測(cè)定中,醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理抗原與抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相支持物上進(jìn)行,反應(yīng)結(jié)果的判斷,以酶與其底物作用后的顯色或產(chǎn)生熒光或發(fā)光反應(yīng)為標(biāo)準(zhǔn),顯色或產(chǎn)生熒光或發(fā)光的強(qiáng)度,與臨床標(biāo)本中待測(cè)物的濃度成正比或反比關(guān)系。目前國(guó)內(nèi)的ELISA試劑盒均以酶的顯色反應(yīng)來(lái)完成測(cè)定。
 
  Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)反應(yīng)時(shí)間注意事項(xiàng):
 
  、在備孔稀釋好待測(cè)樣品和標(biāo)準(zhǔn)品;
 
  2、上板:應(yīng)從后一孔上完板開(kāi)始計(jì)時(shí),以確保反應(yīng)時(shí)間;
 
  3、加底物:應(yīng)從加一孔開(kāi)始計(jì)時(shí),以確保加終止液時(shí)的反應(yīng)時(shí)間是5分鐘。
 
  ELISA試劑盒注意事項(xiàng):
 
  、標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反響。保存過(guò)久可發(fā)作聚合在ELISA中可使本底加深。
 
  2、凍住標(biāo)本溶解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,散布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛混合,不要在混勻器上激烈震蕩。
 
  3、污濁或有沉積的標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,弄清后再檢測(cè)。
 
  4、反復(fù)凍融會(huì)使蛋白效價(jià)下降,所以代測(cè)樣本如需保存作多次檢測(cè),宜少量分裝冰存。

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