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技術(shù)文章

牛淋巴細胞因子ELISA試劑盒實驗操作流程
點擊次數(shù):780 更新時間:2020-11-17

牛淋巴細胞因子ELISA試劑盒操作流程:
. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體00μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育5min。
7. 每孔加入終止液50μL,5min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

洗滌方法:
. 自動洗板機:每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

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