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技術(shù)文章

豚鼠前列腺素D2(PGD2) ELISA試劑盒技術(shù)原理
點(diǎn)擊次數(shù):758 更新時間:2020-09-10

豚鼠前列腺素D2(PGD2) ELISA試劑盒技術(shù)原理:

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白-4(MCP-4)水平。用純化的豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白-4(MCP-4)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入單核細(xì)胞趨化蛋白-4(MCP-4),再與HRP標(biāo)記的單核細(xì)胞趨化蛋白-4(MCP-4)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的單核細(xì)胞趨化蛋白-4(MCP-4)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白-4(MCP-4)濃度。

計(jì)算:

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),    

在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD      

值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋      

倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)      

準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值      

代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋      

倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。     

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